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PCR实验室需要做净化吗?

气溶胶是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系,在气体与液体面摩擦时,比如在操作时比较剧烈地摇动反应管,离心机离心,扩增后PCR产物开盖时、吸样时及移液器枪反复吹吸样品都可形成气溶胶而污染。总之,气溶胶是一个通用的、一般性的概念,只要同时符合“特定粒径和质量的颗粒”,“长时间悬浮”和“在气体介质种”这三个要素的分散体系均可称之为气溶胶。

检验样本和扩增产物经常出现多批次相同的情况,在样本处理环节抽提核酸和检测环节扩增产物泄露均会导致核酸污染,飞溅的扩增产物会形成气溶胶漂浮在空气中,粘附到物体表面及检测人员身体上,核酸气溶胶污染在实验区域内不断累积,日积月累从而导致污染风险不断增加,假阳性的发生频率也越来越高。随着人员及物料流动而污染整个实验室。实验室一旦发生核酸污染极难清除,会造成实验室短期内无法开展工作,因此防范和清除核酸污染是分子检测实验室的工作重点。

核酸气溶胶与PCR过程相伴相生,污染来的悄无声息,防不胜防,假阳性结果让无数生物学子奔溃与抓狂,那我们究竟该如何应对?

第一:自我防护是关键,相对于一线的医生,检测人员的防护服、口罩、防护镜等一个也不能少;《新型冠状病毒实验室生物安全指南》中就指出病毒抗原检测、血清学检测、核酸提取、生化分析,以及临床样本的灭活等操作,应当在生物安全二级实验室进行,同时采用生物安全三级实验室的个人防护。

第二:每次检测实验前后,都要使用专业的核酸气溶胶污染清洁剂,对检测台面、核酸提取仪、PCR仪、手持移液器、离心机、振荡器、空气、门把手、地面、墙壁等位置进行彻底清楚残核酸留气溶胶和潜在污染源,保证检测样本的准确性和检测人员的安全性。

第三:加强气溶胶污染的监测工作。通过专业监测试剂盒对医疗场所和检测场所都进行定期监控,做好防护,一旦发现医疗场所检测出阳性样本,应及时暂定场所的使用。

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